产品分类
- ZYMO
- ZYMO
- brand
- 普兰德
- 美国Beckman Coulter公司
- Allegra X-15R台式冷冻离心机
- Allegra 64R高速冷冻台式离心机
- Allegra X-30/30R台式高速离心机
- Allegra 25R台式高速冷冻离心机
- Microfuge12/12R台式离心机
- Microfuge 20/20R
- Microfuge 16高速台式离心机
- Avanti J-E多用途高效离心机
- Avanti J-30I高效离心机
- Avanti J-HC大容量离心机
- 新一代Avanti JXN-26智能型高效离心机
- 新一代Avanti JXN-30智能型高效离心机
- Avanti J-26XP系列高效离心机
- J6-MI大容量冷冻离心机
- Optima™XPN超速离心机
- Optima™ XE超速离心机
- Optima MAX-TL台式超速离心机
- Optima™ MAX-XP超速离心机
- Vi-CELL XR细胞存活率分析仪
- Qiyunbio
- 北京百泰克
- 德国Miccra 公司
- 德国Memmert公司
- 海乐枫公司纯水与超纯水系统
- 唯地感受态细胞
- 测序服务
- 杭州米欧仪器
- 美国BD公司流式细胞仪
- 美国Zealway公司高温高压灭菌锅
- 弗德
- 英国Ruskinn公司厌氧、微需氧工作站
- Bio-Rad伯乐
- Genstar 产品
- Union 永联
- 新加坡ESCO公司生物安全柜、CO2培养箱
- 实验仪器
- 实验耗材
- 瑞士Infors公司
- Celltron磁力驱动
- Thermotron振荡培养箱
- Minitron-Bacteria振荡培养箱
- Multitron-Bacteria恒温振荡培养箱
- Minitron Cell振荡培养箱
- Multitron Cell全功能细胞培养箱
- RC落地摇床
- Multitherm摇床
- Multitron Standard系列摇床
- Ecotron摇床
- Orbitron 摇床
- Labfors 5 Cell细胞生物反应器
- Techfors Cell大型生物反应器
- Techfors-S Cell中试原位灭菌生物反应器
- Multifors Cell平行生物反应器
- Labfors Lux Cell光照发酵罐
- Minifors Cell细胞发酵罐
- Minifors Bacteria实验台式发酵罐
- Labfors 5 Bacteria 实验发酵罐
- Labfors Lux光照发酵罐
- Multifors Bacteria 平行发酵罐
- Techfors-S Bacteria中试型发酵罐
- Terrafors Bacteria固态样品发酵罐
- Techfors大型发酵系统
- X-Controlle发酵体系控制系统
- CELLine膜培养瓶
- 实验技术服务
- 武汉优尔生 cloud-clone ELISA kit
- CST
- Omega
- Abcam
- 常用试剂
- Abmart 抗体
- 阿拉丁
- Fermentas
- Invitrogen
澳门六开彩开奖结果历史
联系我们
- 地 址：深圳市南山区西丽街道九祥岭工业区
- 电 话：13006636686，13751058447，0755-33160345
- 传 真：0755-33160345
- 邮 箱：3344179313@qq.com
产品编号：QR1015-200T
产品价格：¥ 720
产品简介：产品名(ming)称(cheng) 质粒(li)(li)小(xiao)(xiao)量提(ti)(ti)取(qu)试(shi)剂(ji)盒(he)；质粒(li)(li)小(xiao)(xiao)提(ti)(ti)中量提(ti)(ti)取(qu)试(shi)剂(ji)盒(he) 产品内容 质粒(li)(li)提(ti)(ti)取(qu)试(shi)剂(ji)盒(he) 产品用途(tu) 质粒(li)(li)提(ti)(ti)取(qu) 储存(cun)条件 室(shi)温保(bao)存(cun) 保(bao)质期(qi) 1年
试剂(ji)盒内容
|
试剂盒组(zu)成 |
QR1015-50T |
QR1015-100T |
QR1015-200T |
|
RNaseA |
400 μL |
800 μL |
1600 μL |
|
溶(rong)液Ⅰ |
30 mL |
60 mL |
120 mL |
|
溶(rong)液Ⅱ |
30 mL |
60 mL |
120 mL |
|
溶液Ⅲ |
40 mL |
80 mL |
160 mL |
|
漂洗(xi)液(ye)Ⅰ |
24 mL |
48 mL |
96 mL |
|
漂洗液Ⅱ |
15 mL |
15 mL×2 |
15 mL×4 |
|
洗脱(tuo)液 |
30 mL |
60 mL |
120 mL |
|
吸附柱 |
50个 |
100个 |
200个 |
|
收集管(guan) |
50个 |
100个 |
200个 |
|
说明书 |
1份 |
1份 |
1份(fen) |
产品说明：
本(ben)试剂(ji)盒采用碱裂解法(fa)裂解细胞，根(gen)据离心吸附柱在高盐状态下特异性地结(jie)合溶(rong)液中的 DNA的原理(li)特异性提(ti)取质粒DNA。离心吸附柱中采(cai)用的硅基质材(cai)料能高效、专一地(di)吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋(dan)白(bai)及细胞中(zhong)其他有机(ji)化合物。使用本试剂盒提取的(de)质粒(li)DNA可适用于(yu)各种常(chang)规操作，包(bao)括酶切、PCR、测(ce)序、连接(jie)和转(zhuan)化(hua)等(deng)试验(yan)。
使用(yong)前请(qing)先在漂(piao)洗液中加入无水乙醇，加入体(ti)积(ji)请(qing)参(can)照瓶体(ti)上(shang)的标签。溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(将(jiang)试剂盒中提(ti)供的 RNaseA 全部(bu)加入)，混(hun)匀，置(zhi)于 2-8℃保存。如非(fei)指明，所有离(li)心(xin)步骤均为使用(yong)台式离(li)心(xin)机在室温(wen)下离(li)心(xin)。
操作步骤（仅供参考）：
1、取10-15mL细菌培养物(wu)，12000rpm离心(xin)1min，尽(jin)量吸除(chu)上(shang)清(可以通过多次离心将菌体沉淀收集到一(yi)个2mL 离心管(guan)中)。
2、向留有菌体沉淀的(de)离心管(guan)中(zhong)加(jia)入 500μL 溶液Ⅰ(请先检查是否已(yi)加入RNaseA)，使用移(yi)液器或(huo)旋(xuan)涡振荡器彻底(di)悬浮细菌(jun)细胞(bao)沉淀。注意:如果菌块未彻底混匀，会影响裂解导致质(zhi)粒提取量和纯度偏低。
3、向离心管(guan)中加(jia)入500μL溶液Ⅱ，温和地上下(xia)翻(fan)转6-8次使菌体(ti)充分裂解(jie)。注意(yi):混匀一定要温和以免污染细菌(jun)基因组DNA，此时(shi)菌液应变(bian)得清亮粘稠，作用时(shi)间不要超过5min，以免(mian)质(zhi)粒(li)受(shou)到破坏。
4、向离心管中加入(ru)700μL溶液Ⅲ，立即温和地上下翻转6-8次(ci)，充分混(hun)匀，此时会出现(xian)白色絮沉淀(dian)。12000rpm离(li)心10 min，用移(yi)液器小心地将(jiang)上清转移(yi)到另一(yi)个干净的离心管中(zhong)，尽量不要吸(xi)出沉淀。注(zhu)意:溶(rong)液Ⅲ加入后应(ying)立即(ji)混(hun)合，避免产生局(ju)部沉淀。如(ru)果上清中还有(you)微(wei)小白色沉淀，可再(zai)次离心后(hou)取上(shang)清。
5、将上一步所得上清液加入吸附柱(zhu)中(吸(xi)附柱加入收集(ji)管中)，空温放置2min，12000rpm离心1min，倒掉收(shou)集管中(zhong)的废液(ye)，将吸附柱重(zhong)新放回收(shou)集管中(zhong)。
6、向(xiang)吸附(fu)柱中加入500μL漂洗液Ⅰ(使(shi)用前请先检查是否已加(jia)入无水乙醇(chun))，12000rpm离心1min，弃废(fei)液，将吸附柱放入收集管中。
7、向吸附柱中(zhong)加入700μL漂洗液Ⅱ(使用前(qian)请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附(fu)柱(zhu)放入收集(ji)管中(zhong)。
8、向吸附柱中(zhong)加入(ru)700μL漂洗(xi)液Ⅱ，12000rpm 离心1min，弃废液，将(jiang)吸附柱(zhu)放入(ru)收集(ji)管(guan)中。
9、12000rpm离(li)心2min，将吸附柱敞(chang)口置(zhi)于室温或50℃温(wen)箱放(fang)置数分钟(zhong)，目的是将(jiang)吸附柱(zhu)中(zhong)残余的漂洗液去除，否(fou)则漂洗液中(zhong)的乙醇(chun)会影响(xiang)后续的实验如酶(mei)切(qie)、PCR等。
10、将吸(xi)附(fu)柱放入一个干净的离心(xin)管(guan)中(zhong)，向吸(xi)附(fu)膜中(zhong)央悬空滴加100-300μL经65℃水(shui)浴热的洗脱液，室温放置2min，12000rpm离心1min。
11、为了增加质粒的(de)回收效率，可将(jiang)得到(dao)的(de)洗脱液重(zhong)新(xin)加入吸附柱中(zhong)，室温放(fang)置(zhi)2min，12000rpm离(li)心1min。
注(zhu)意事项(xiang)：
1、使用前请先(xian)检(jian)查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出现混浊，如有混浊现象，可在 37℃水浴中加(jia)热几(ji)分钟(zhong)，待(dai)溶(rong)液恢复澄清后(hou)再使用。溶(rong)液Ⅱ、溶液(ye)Ⅲ、漂洗(xi)液Ⅰ和漂洗液(ye)Ⅱ使用后(hou)应(ying)立即拧紧盖子(zi)。
2、洗脱(tuo)缓冲液体积不应少于100μL，体积(ji)过小影响回收(shou)效(xiao)率；洗脱液的(de)pH值(zhi)对洗脱(tuo)效率也有(you)影响，若需要用(yong)水(shui)做洗脱(tuo)液应保证其pH值在8.0左(zuo)右(可用NaOH将水(shui)的pH值调至此(ci)范围(wei))，pH值低于7.0会降(jiang)低洗脱效率，DNA产(chan)物应保存在-20℃，以防 DNA 降解。
3、DNA浓度及纯(chun)度检测：得到的质粒DNA纯(chun)度(du)与样品保存(cun)时间、操作过程中的(de)剪切力等因素有关。得(de)到的(de)DNA可用琼脂糖疑胶电泳和紫外分光光度计检测浓(nong)度与纯度。DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相(xiang)当于(yu)大约50ug/mL双链DNA、40ug/mL单链DNA。OD260/OD280比(bi)值应为1.7-1.9，如(ru)果洗脱(tuo)(tuo)时不使用(yong)洗脱(tuo)(tuo)缓冲液(ye)，而使用(yong)去离子(zi)水，比值会偏低，因为pH值(zhi)和(he)离子存在会影(ying)响吸光值(zhi)，但并不(bu)表示纯(chun)度(du)低。