澳门六开彩开奖结果历史

货(huo)号：QR1016            ;     规格：5 次/ 10次(ci)

保(bao)存：常温保存，复检(jian)期1年。(注(zhu):RNaseA以附件形式(shi)发货，收到未使用前请(qing)-20℃保存)

试剂(ji)盒(he)内(nei)容(rong)：

产品说明：

本试(shi)剂盒采用异丙醇沉淀法提取质粒DNA，简(jian)单易行，只需要常规离心机和几(ji)种(zhong)简(jian)单的试(shi)(shi)剂，操作步骤(zhou)较(jiao)少。使用本试(shi)(shi)剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常(chang)规操作，包括酶切、PCR、测(ce)序、连(lian)接(jie)和(he)转化等(deng)实(shi)验(yan)。

如非指明，所有离心步(bu)骤均为(wei)使用台式离心机在(zai)室温(wen)下离心。

操作(zuo)步(bu)骤（仅供参考）：

1、取100-500 mL细菌培养物转入500 mL离心管中，4000 rpm离心10 min，尽量吸除上清。

2、向留有菌体沉淀(dian)的(de)离心(xin)管中加(jia)入 10 mL 溶液Ⅰ，使用旋涡振荡器或其他方法彻底悬浮细(xi)菌细(xi)胞沉淀，悬浮(fu)沉(chen)淀需(xu)均匀(yun)，不应留有小的菌块。注意:如(ru)果菌块未彻底(di)混匀，会影响裂解导致质(zhi)粒提取量和纯度偏低。

3、向离心(xin)管(guan)中加入(ru)10 mL溶液Ⅱ，温(wen)和地上(shang)下(xia)翻转(zhuan)6-8次使菌体(ti)充(chong)分裂解。注意:混(hun)匀(yun)一(yi)定要(yao)温(wen)和以免污染(ran)细菌(jun)基因(yin)组DNA，此时菌液(ye)应变得(de)清亮粘稠(chou)，作用时间(jian)不要(yao)超过5 min，以免(mian)质粒受到破坏。

4、向离心管中加入15 mL溶液Ⅲ，立(li)即温(wen)和地上下翻转6-8次，充分(fen)混(hun)匀，此时会(hui)出(chu)现白色絮沉(chen)淀。

5、将上述液(ye)体在 -20 ℃放置30 min，4000 rpm离心(xin)20 min。

6、分(fen)别吸取上清液至(zhi)新的(de)离心管中，按1：100比例(li)加入Rnase A，37 ℃孵育 39 min。

7、向离心管中加入等体积的(de)异丙醇， -20 ℃沉淀60 min，4000 rpm离心(xin)20 min，弃上清。

8、加入70 ％乙醇1 mL洗涤，4000 rpm 离心10 min，弃废液。

9、室温烘干(gan)质粒，加入1 mL经(jing)65℃水浴加热的洗脱液(ye) TE，室(shi)温放置(zhi)2 min，溶解质粒。

10、电泳检(jian)测(ce)质(zhi)粒纯度，或(huo)者紫外分光光度计检(jian)测(ce)浓度。