澳门六开彩开奖结果历史

货号：QR1016                 规格：5 次/ 10次

保存：常温保存，复检期(qi)1年。(注:RNaseA以(yi)附件形式发货，收到未使(shi)用(yong)前请-20℃保存(cun))

试剂(ji)盒(he)内容：

产品说明：

本试剂盒采(cai)用异丙醇沉淀法提取(qu)质粒DNA，简单易(yi)行，只需要常规离心机和几种简单的(de)试剂，操作(zuo)步骤较少。使用本(ben)试剂盒提(ti)取的(de)质粒DNA可(ke)适用于各种常规操作，包括(kuo)酶切(qie)、PCR、测序、连(lian)接(jie)和转化等(deng)实验(yan)。

如非指明，所有离(li)心步骤均为使用(yong)台式离(li)心机在室温(wen)下离(li)心。

操(cao)作步骤（仅供参(can)考）：

1、取100-500 mL细菌培养物转入(ru)500 mL离心管中，4000 rpm离心10 min，尽量吸(xi)除上(shang)清。

2、向留有(you)菌体沉淀的(de)离心管中加(jia)入 10 mL 溶(rong)液Ⅰ，使用(yong)旋涡振荡器或其他方法彻底悬(xuan)浮细菌细胞(bao)沉淀，悬浮沉淀需均匀，不应留有小的菌块(kuai)。注意:如果菌块未彻底混匀(yun)，会(hui)影响裂解导(dao)致质粒提取量和纯度(du)偏低。

3、向离心(xin)管中(zhong)加入(ru)10 mL溶(rong)液Ⅱ，温和(he)地上(shang)下(xia)翻转6-8次(ci)使菌体充分裂解。注意:混匀一定要温和以免污染细菌基因组DNA，此时(shi)菌液(ye)应(ying)变得清亮粘稠，作(zuo)用时(shi)间不要超过5 min，以免质粒受到(dao)破坏(huai)。

4、向离心管中加入15 mL溶液(ye)Ⅲ，立即温(wen)和地上下翻(fan)转(zhuan)6-8次，充(chong)分(fen)混匀，此时会出现(xian)白(bai)色絮沉淀。

5、将上述液(ye)体在 -20 ℃放(fang)置30 min，4000 rpm离心20 min。

6、分别吸取上清液至新的离心(xin)管中，按(an)1：100比(bi)例加入Rnase A，37 ℃孵育 39 min。

7、向离心管中加入等体积的(de)异丙醇， -20 ℃沉淀(dian)60 min，4000 rpm离心20 min，弃上清。

8、加入70 ％乙醇(chun)1 mL洗涤，4000 rpm 离心10 min，弃废液。

9、室温烘干(gan)质粒(li)，加(jia)入1 mL经(jing)65℃水(shui)浴(yu)加(jia)热的洗脱液 TE，室温放置2 min，溶解质粒。

10、电泳检测(ce)(ce)质粒纯度，或者紫外分光光度计检测(ce)(ce)浓(nong)度。