澳门六开彩开奖结果历史

货(huo)号：QR1016                 规格：5 次/ 10次

保存：常温(wen)保存，复检(jian)期1年。(注:RNaseA以附(fu)件(jian)形式发货，收到(dao)未使(shi)用前请-20℃保存)

试(shi)剂盒(he)内容：

产(chan)品(pin)说明：

本(ben)试剂盒采用异丙醇沉淀法(fa)提(ti)取质粒DNA，简单易行，只需要(yao)常(chang)规离心机和几(ji)种简单的(de)试剂，操作(zuo)步骤(zhou)较少(shao)。使用(yong)本试剂盒提取的(de)质粒DNA可适用于各种常规操作，包(bao)括酶切、PCR、测序、连(lian)接和(he)转化等实验。

如(ru)非(fei)指(zhi)明，所(suo)有离心(xin)步(bu)骤均为使用台式离心(xin)机(ji)在室温(wen)下离心(xin)。

操(cao)作步骤(zhou)（仅(jin)供参考）：

1、取100-500 mL细菌培养(yang)物(wu)转入500 mL离心管(guan)中，4000 rpm离心10 min，尽量吸除(chu)上清。

2、向(xiang)留有菌体沉(chen)淀的离心管中加入 10 mL 溶液Ⅰ，使用(yong)旋(xuan)涡振(zhen)荡器(qi)或其(qi)他方(fang)法彻底悬浮细(xi)菌细(xi)胞(bao)沉淀，悬浮沉淀需(xu)均匀，不应(ying)留有(you)小的(de)菌块。注意:如果菌块未(wei)彻底混匀，会影响裂解导致质粒提取量和纯(chun)度(du)偏低。

3、向离心管中(zhong)加入10 mL溶液Ⅱ，温和(he)地上下翻转6-8次使(shi)菌体充分裂解。注意:混匀(yun)一定要温和以免(mian)污染细菌基因组(zu)DNA，此时(shi)菌液(ye)应变得清亮粘稠，作(zuo)用时(shi)间(jian)不(bu)要超(chao)过(guo)5 min，以免质(zhi)粒受到破坏。

4、向离(li)心管中(zhong)加(jia)入15 mL溶液Ⅲ，立即温(wen)和地上下翻转(zhuan)6-8次(ci)，充分(fen)混匀，此时会出现白(bai)色絮沉淀。

5、将上述液体在 -20 ℃放置(zhi)30 min，4000 rpm离心20 min。

6、分别吸取上清液(ye)至新的离心管(guan)中，按1：100比例(li)加入Rnase A，37 ℃孵育 39 min。

7、向离心管中加入等体(ti)积的异丙(bing)醇， -20 ℃沉淀60 min，4000 rpm离(li)心20 min，弃上清。

8、加入70 ％乙醇1 mL洗涤，4000 rpm 离心10 min，弃废液。

9、室温烘干质粒，加(jia)入1 mL经65℃水浴(yu)加热的洗脱液 TE，室温放(fang)置2 min，溶解质粒。

10、电泳检测(ce)质(zhi)粒纯度(du)，或者紫外分光(guang)光(guang)度(du)计检测(ce)浓度(du)。