澳门六开彩开奖结果历史

产品编号(hao)：QR1017

制(zhi)品内容

产(chan)品简介

本(ben)产品(pin) GeL & PCR Purification Kit 既适用于从普通或低熔(rong)点琼脂糖凝胶中回(hui)收DNA 片段，也可(ke)用于(yu) P°CR 产物(wu)或酶切产物(wu)中 DNA 片段的纯(chun)化，能够(gou)有效去(qu)除(chu)蛋白(bai)质(zhi)、有机(ji)化合(he)物、无(wu)机(ji)盐离子及(ji)寡核昔酸(suan)引物等杂质(zhi)。该试剂盒(he)适用于 100 bp~30 kb 大小DNA片段的回(hui)收，回(hui)收率(lv)高达 80% 以上，每个离心吸附柱每次(ci)可吸附的 DNA 量约为 10 g,洗脱(tuo)体积不低于 30 μL。该试剂(ji)盒纯化(hua)回收的(de) DNA 纯(chun)度(du)高，完整(zheng)性好，下游可(ke)用于酶切、PCR、测(ce)序、文库筛选(xuan)、连接(jie)和转化等实验。

保存： 室温保(bao)存

使用方法(fa)

琼脂(zhi)糖凝胶回收

(1). 使用前(qian)请先确认(ren) Buffer PW 中已经加入相应体(ti)积的无水乙醇

(2). 将目的 DNA 条带从琼(qiong)脂糖(tang)凝胶中切下 (尽(jin)量切除多余凝胶)，放入干(gan)净的离心管(guan)(自(zi)备)中，称(cheng)量计算(suan)凝胶重量(提前记录离(li)心(xin)管重(zhong)量并扣(kou)除(chu))。注意(yi)：较大(da)的胶块可以切碎，以保证溶胶效果。

(3). 向凝胶中加入 3 倍(bei)体积的溶胶液 Buffer PN (凝胶体积的计算(suan)方法举例(li)：若凝胶的重(zhong)量为 100 mg，其体(ti)积可视为 100 μL（以此类推(tui)）;置(zhi)于65 ℃温育，期间(jian)每(mei)隔2~3 min 温和地上下颠倒(dao)离心管(guan)，以确保(bao)胶(jiao)块完全(quan)溶解(jie)。

(4). 待(dai)上述溶(rong)胶液温(wen)(wen)度降至室温(wen)(wen)后再加入到吸附柱中，室温(wen)(wen)放置 ;2 min，12000 rpm 离心1 min，倒掉收(shou)集管(guan)中(zhong)的(de)废液(ye)，将吸附(fu)柱重新放入(ru)收(shou)集管(guan)中(zhong)。

注意 1: 当回收片段< 500 bp 时，溶胶(jiao)液转移到吸附柱前(qian)需要先加(jia)入(ru) 1 倍胶体积的(de)异丙(bing)醇，上(shang)下颠(dian)倒混(hun)匀。

注意 2: 吸附柱的容(rong)积为 800 μL，若体积大于 800 μL 可分批加入。

(5). 向吸(xi)附柱中加入(ru)600 μL漂洗液 Buffer PW (确(que)认(ren)已经加入无水(shui)乙醇(chun)) ，12000 rpm 离心1 min，倒掉收集管中的废(fei)液，将(jiang)吸附(fu)柱重新放入收集管中。注意(yi):如果(guo)回(hui)收的 DNA 下游是(shi)用于盐感的(de)实验(yan)（例(li)如: 平末端连(lian)接或(huo)直接测序）建议(yi)加入漂洗液(ye)后静置(zhi) 2~5 min 再离心。

(6). 重复步骤（5）。

(7). 将吸附(fu)柱放入收集管中，12000 rpm 离(li)心(xin)1 min 去除残留的(de)漂洗(xi)液(ye)，将吸附(fu)柱(zhu)室温放置2~5 min，保证乙醇(chun)彻底挥发(fa)。

注意: 漂洗液中残(can)留的乙醇会影响后续的酶反应实验(yan)。

(8). 将吸附柱放(fang)到新的 1.5 mL 离(li)心管(guan)中(zhong)，向吸附膜中(zhong)间(jian)悬空加(jia)入(ru) 30~50 μL 洗脱液 Buffer EB，室(shi)温放置 2 min，12000 rpm 离心(xin)1 min。收集到的(de)即为 DNA 溶液(ye)，可立(li)即(ji)使用或(huo)置(zhi)于 -20°°C保存。

注意 1: 洗(xi)脱液 EB 的(de)体积不应少(shao)于 30 μL，体(ti)积过少会(hui)影响(xiang)回(hui)收的效率(lv)。

注(zhu)意 2: 将(jiang)洗脱液 EB 加热至 65°C再洗脱，可明显提高回收效率(lv)。

PCR 产物或酶切产物回收

（1） 使(shi)用前请(qing)先(xian)确(que)认 Buffer PW 中已(yi)经加入相应体积的无水乙醇

（2） 根据 P°CR 反(fan)应(ying)液或酶切反(fan)应(ying)液体积，向其中加入3 倍体积的 Buffer PN，充分混匀。

（3） 将上述(shu)溶(rong)液加入到吸附柱中(zhong)，室温放置 2 min，12000 rpm 离(li)心 1 min，倒(dao)掉收集管(guan)中(zhong)的(de)废液，将吸附柱(zhu)重新放入收集管(guan)中(zhong)。

注意 1: 当回收片(pian)段< 500 bp 时(shi),上(shang)述(shu)溶液转移到吸(xi)附柱前需(xu)要先加入(ru)1倍样品体积的(de)异丙醇,上下颠倒(dao)混(hun)匀。

注意 2: 吸附柱的(de)容(rong)积为 800 μL，若(ruo)体积大(da)于 800 pL 可分批(pi)加(jia)入。

（4） 向吸(xi)附柱中加(jia)入(ru) 600 μL 漂洗液 Buffer Pw (确认已(yi)经(jing)加入无水乙(yi)醇) ，12000 rpm 离(li)心1 min，倒(dao)掉收集(ji)管中的(de)废液，将吸附柱重(zhong)新放(fang)入收集(ji)管中。个注:如果回收(shou)的 DNA 下(xia)游是(shi)用于盐(yan)敏感的实(shi)验(例如: 平末端(duan)连接或直接测序(xu)) ，建议加入漂洗液后静置 2~5 min 再离心