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制品内容

Qizyme HiFi DNA Polymerase （2 U / µl）        50 µl (500ul)

5× Qizyme HiFi Reaction Buffer   ;              1 ml (10ml)

dNTP Mixture（10 mM）                         100 µl (1000ul)

产品简介

Qizyme HiFi DNA Polymerase是一种超保真DNA聚合(he)酶(mei)(mei)， 该(gai)酶(mei)(mei)具(ju)有优(you)越的(de)(de)可(ke)靠性(xing)和(he)高(gao)特异性(xing)， 适合(he)扩(kuo)增(zeng)长链DNA，并且显著地减少PCR延伸时(shi)间。通过改良提高(gao)了持续合(he)成(cheng)能力和(he)PCR扩(kuo)增(zeng)速(su)率，结(jie)合(he)该(gai)酶(mei)(mei)的(de)(de)3’-5’核酸外切酶(mei)(mei)活性(xing)使得其(qi)保真性(xing)是普通Taq酶(mei)(mei)的(de)(de)50倍。而该(gai)酶(mei)(mei)的(de)(de)独特结(jie)构(gou)使其(qi)即便在(zai)有PCR抑制剂存在(zai)的(de)(de)情况(kuang)下，也能快速(su)有效的(de)(de)得到目(mu)的(de)(de)产(chan)物。该(gai)酶(mei)(mei)PCR扩(kuo)增(zeng)产(chan)物为平末端。

贮存溶液

20 mM Tris-HCl（pH7.4 @ 25°C），100 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，稳定剂(ji)，50% 甘油。

保存： -20 °C

优势

1）保真度高：确保PCR复制的精确程度

2）快速：延伸时间(jian)短（15-30秒/ kb）

3）方便：功能强劲，只需最少的优化

4）高(gao)(gao)产(chan)量：用更少的酶，获得(de)更高(gao)(gao)的产(chan)量

用途

1）高保真(zhen)PCR

2）快(kuai)速菌落PCR

3）高通(tong)量PCR

4）克隆

PCR产物

使(shi)用(yong)(yong)Qizyme HiFi DNA Polymerase扩增的(de)产物为平末(mo)端，如果产物用(yong)(yong)于克隆，建议使(shi)用(yong)(yong)平末(mo)端连(lian)接。如果需

 要(yao)进行T / A克隆， 在加A之前需(xu)要(yao)纯化(hua)DNA， 引入Qizyme HiFi DNA Polymerase会降解产生的突出端(duan)。

反应条件

50 µl反应(ying)体系中含(han)有(you)：1× Reaction Buffer，DNA模板，0.2 µM上游引物，0.2 µM下(xia)游引物，0.2 mM dNTP，1 U Qizyme HiFi DNA Polymerase。

单位定义

一个单位 Qizyme HiFi DNA聚合(he)酶可在 74 °C，在 30 分(fen)钟内向不溶(rong)于酸材(cai)料中(zhong)掺(chan)入 10 nmol脱(tuo)氧核(he)糖核(he)苷酸。

PCR反应液组成 (Total 50 µl)

注意：PCR反应建立后，将反应物上下颠倒混匀，短暂离心将液体收集到管底。如果使用的PCR循环仪没有加热盖，可在样品上覆盖矿物油。PCR反应条件 （举例）